Produktname |
3'-Phosphat / 5'-Hydroxy-Nucleinsäure-Ligase |
Beispielstruktur |
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Synonyme |
3'-P RNL, MXAN_0280, MXAN_4982, RNA-Spleißligase, rtcB, RtcB-RNA-Ligase, Rtcb-1, RtcB1, Trl1, tRNA-Spleißligase, tRNA-Spleißligase |
EG-Nummer |
6.5.1.8 |
CAS Registry Number |
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Ihre Nachricht |
Das Enzym ist eine GTP- und Mn2 + -abhängige 3'-5'-Nukleinsäureligase mit der Fähigkeit, RNA mit 3'-Phosphat- oder 2 ', 3'-cyclischen Phosphatenden mit RNA mit 5'-Hydroxyenden zu verbinden. Es kann auch DNA mit 3'-Phosphatenden mit DNA mit 5'-Hydroxyenden verbinden, vorausgesetzt, die DNA-Termini sind ungepaart [6]. Das Enzym kommt in Mitgliedern aller drei Lebensreiche vor und ist in Metazoen für das Spleißen von Intron-haltigen tRNAs essentiell. Die Reaktion folgt einem dreistufigen Mechanismus mit anfänglicher Aktivierung des Enzyms durch GTP-Hydrolyse, wobei eine Phosphoramidbindung zwischen dem Guanylat und einem Histidinrest gebildet wird. Die Guanylatgruppe wird auf den 3'-Phosphat-Terminus des Substrats übertragen und bildet die verkappte Struktur [DNA / RNA] -3 '- (5'-Diphosphoguanosin). Wenn ein geeignetes 5'-OH-Ende verfügbar ist, katalysiert das Enzym einen Angriff des 5'-OH auf das verkappte Ende, um einen 3'-5'-Phosphodiester-Spleißübergang zu bilden, wobei das Guanylat freigesetzt wird. Wenn das Enzym auf ein RNA-2 ', 3'-cyclisches Phosphat einwirkt, analysiert es eine zusätzliche Reaktion und hydrolysiert das cyclische Phosphat zu einem 3'-Phosphat [9]. Das Metazoanenzym benötigt aktivierende Cofaktoren, um eine Mehrfachumsatzkatalyse zu erreichen [8]. |
Cofaktor |
Mn2 + |
Geschichte |
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Reaktionen |
(1) (Ribonukleotid) (n) -3'-Phosphat + 5'-Hydroxy- (Ribonukleotid) (m) + Gtp = (Ribonukleotid) (n + m) + gmp + Diphosphat. (2) (Ribonukleotid) (n) -2 ', 3'-Cyclophosphat + 5'-Hydroxy- (Ribonukleotid) (m) + Gtp + H (2) O = (Ribonukleotid) (n + m) + gmp + Diphosphat (Gesamtreaktion). |